武汉阳达生物科技有限公司供应武汉氯霉素ELISA检测试剂盒


氯霉素（Chloramphenicol）ELISA检测试剂盒
  
 一、概要
 氯霉素 （Chloramphenicol, CAP）曾是应用广泛的抗菌素，但由于其存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病， 欧美等发达国家已相继禁止或严格禁止使用。
 本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代药物残留检测产品，操作时间仅需60min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
 二、试验原理
 本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被氯霉素抗体，样本中残留的氯霉素和酶标氯霉素抗原竞争微孔条上预包被的抗体，用TMB底物显色，样本吸光值与其残留物氯霉素的含量成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中氯霉素的含量。
 三、适用范围
 可定性、定量检测动物组织、牛奶、蜂蜜、饲料、鸡蛋等样本中氯霉素的残留量。
 
四、交叉反应率
 氯霉素………………………………………………100％
 氯霉素碱……………………………………………0.5％
 甲基氯霉素………………………………………≤0.05％
 氟苯尼考…………………………………………<0.01%
 氟苯尼考胺…………………………………………<0.1%
 四环素、庆大霉素及氨苄青霉素未显现任何交叉反应。
 五、检测步骤
 测定前应须知：
 1、使用之前将所有试剂和需用板条的温度回升至室温（20～25℃）。
 2、使用之后立即将所有试剂放回2～8℃。
 3、在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，正确的洗板操作是ELISA测定程序中的要点。
 4、在所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。
 操作步骤：
 1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
 2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。
 3、洗涤工作液在使用前也需回温。
 4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
 5、加标准品/样本：加标准品/样本70ml到对应的微孔中，再加入酶标氯霉素30ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
 6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300ml/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。
 7、显色：加入底物液A液50ml/孔，再加底物液B液50ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应20～30min。
 8、测定：加入终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。
 
  七、检测方法灵敏度、准确度、精密度
 试剂盒灵敏度：0.05ppb
 样本最低检测限：
 组织样品………………………………0.025ppb
 牛奶………………………………………0.05ppb
 饲料…………………………………………0.2ppb
 蛋…………………………………………………0.05ppb
 蜂蜜………………………………………………0.05ppb
 回收率：
 组织样品……………………………………… 102±15%
 牛奶…………………………………………… 110±10%
 饲料………………………………………………93±10%
 蛋…………………………………………………95±15%
 蜂蜜………………………………………………80±10%
 精密度：
 试剂盒的变异系数均小于10%
 



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